实用糖尿病杂志
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种食用菌生物活性肽对高强度运动耐力训练中生

食用菌中含有许多生物活性肽,按其对人体的功效可分为降压、降血糖的活性肽,抗氧化、抗凝血、抗病毒的活性肽等多种类型[1]。目前食用菌生物活性肽对运动人群的影响研究较少[2]。故对高强度运动和耐力训练中,生物活性肽调节机体生化指标的机理展开了试验。

1 试验材料

1.1 试验材料与试剂

供试材料:盐酸二甲双胍片,中美上海施贵宝制药有限公司;灵芝肽、姬松茸肽粉,扶风斯诺生物科技有限公司;茶树菇多肽、双孢菇肽粉,兰州沃特莱斯生物科技有限公司提供;云芝肽粉,宁陕国圣生物科技有限公司;四氧嘧啶,上海晶抗生物工程有限公司;盐酸苯乙双胍,济南胜瑞祥医药科技开发有限公司;蒸馏水(分析纯),济南青玉元商贸有限公司。

1.2 试验动物

选用健康4周龄昆明二级雄性小白鼠,体重为(20±2) g,由第四军医大学动物研究中心提供。对小鼠进行分笼饲养,每笼10只。饲养条件为标准动物饲料喂养,自由饮食和饮水,饲养温度25℃,相对湿度50%,室内照明12 h/12 h光暗交替周期,小鼠试验前均适用性喂养1周。

1.3 试验药品与仪器

BS-300全自动生化分析仪,深圳迈瑞公司;高速离心机,广州市正一科技有限公司;血糖试纸(葡萄糖脱氢酶法),雅培糖尿病护理有限公司;YJ超净工作台,苏州市苏净集团安泰公司;BIOICE01-冰浴器,明日百傲(北京) 科技有限公司;BSZ10S分析天平,北京赛多利斯天平有限公司。

2 试验方法

2.1 食用菌生物活性肽降血糖试验

小鼠适用性喂养1周最后一次喂食2 h后,用葡萄糖试纸测量小鼠的尿糖,挑选试纸为浅蓝色阴性的小鼠20只为一组,作为阴性对照组。

小鼠适用性喂养1周,最后一次喂食后禁食24 h。给小鼠腹腔注射配置好的四氧嘧啶注射液100 mg·kg-1,3 d后,测量小鼠的尿糖[3],选取定性测定尿糖含量值为“+++”的小鼠分5组,每组20只,分别为阳性对照组、西药对照组、活性肽高剂量组、活性肽中剂量组和活性肽低剂量组。

尿糖阴性对照组(第1组),灌胃20 mL·kg-1的生理盐水;阳性对照组(第2组),即四氧嘧啶糖尿病模型对照组,灌胃20 mL·kg-1生理盐水;西药对照组(第3组),灌胃20 mL·kg-1盐酸苯乙双胍水溶液;活性肽高剂量组(第4组),灌胃400 mL·kg-1活性肽溶液;活性肽中剂量组(第5组),灌胃200 mL·kg-1活性肽溶液;活性肽低剂量组(第6组),灌胃100 mL·kg-1活性肽溶液。

以上6组小鼠均持续给药14 d,正常饲养投喂饲料、自由饮水进食。第7天最后一次给药后进行称重,随机挑选10只小鼠禁食12 h,采用断颈法处死小鼠,立即摘取眼球取血,测量小鼠血糖含量[5];第14天最后1次给药后,将每组剩余的10只小鼠也采用同样的方法禁食12 h,测量小鼠血糖含量。通过与阴性对照组的比较,评价血糖指标的高低;通过与阳性对照组的比较,评价降血糖的效果的优劣。

2.2 食用菌生物活性肽对小鼠体重和负重游泳耐力影响的试验

小鼠适用性喂养1周后,选用健康小鼠60只,分成6组。灵芝肽、姬松茸肽、茶树菇肽、双孢菇肽、云芝肽粉末,分别按1∶1加蒸馏水混合均匀,得5种生物活性肽样品溶液,每日定时经口灌胃样品溶液1次,剂量为1 g·kg-1;对照组(CK) 每日定时经口灌胃1次同样体积的蒸馏水。每日上午定时对每只小鼠进行称重记录体重,并进行2次游泳训练,每次15 min,下午定时进行小鼠灌胃,连续30 d,期间正常饲养小鼠。最后一次灌胃1 h后,取各组小鼠10只进行负重游泳试验[4],在小鼠尾部系体重5%的铅皮,将小鼠放置于水箱,水温为(25.) ℃,记录小鼠从入水至全部身体沉入水中的时间作为小鼠负重游泳时间。

3 试验结果与分析

3.1 四氧嘧啶对小鼠血糖和体重指标的影响

四氧嘧啶对小鼠体重的影响见表1。

表1 四氧嘧啶对小鼠体重的影响Tab.1 Effects of different component on body weight of mice初始 7 d 14 d第 1 组(阴性组) 20. 21. 24.组别 体重/g第 2 组(阳性组) 21. 19. 17.

由表1可知,在本次试验中,第2组的小鼠体重有明显减轻,较第1组正常对照组小鼠体重第一周后平均减少 14.86%,第二周后平均减少达40.16%。同时,试验中观察到第2组小鼠发现有活动异常现象,出现饮水和排尿频率增加和多次进食的现象,观察毛色变暗、有掉毛情况,与糖尿病表现一致。